CRISPR/Cas9技术的出现改变了整个基因编辑领域,然而在人脂肪组织中的应用还没有成功的案例。近日,瑞典顶/尖大学Uppsala University研究人员在SCIENTIFIC REPORTS上发表文章,利用CRISPR/Cas9技术敲除FKBP5和PPARG基因,之后探讨对人脂肪细胞分化和代谢的影响。
其中,法国Bertin公司智能显微成像系统InCellis助力研究人员对不同处理的人脂肪细胞进行高灵敏度的荧光成像、不同荧光通道的叠加成像、相差成像以及细胞计数,结果如下图:
研究人员使用Hoechst对细胞核染色并通过Incellis蓝色(DAPI)荧光通道成像,使用Alexa Fluor 594对FKBP51和PPARG基因染色并通过InCellis红色(Texas-Red)荧光通道成像,之后两个通道叠加成像。研究人员对比了WT、Negative和分别敲除两个基因之后不同脂肪细胞的图片。
研究人员同时也对比了WT、Negative和分别敲除两个基因之后不同脂肪细胞分化的情况,分别在第0天、7天、14天记录了明场成像,其中在14天时使用BODIPY对脂肪进行染色并通过InCellis绿色(GFP)荧光通道成像,更加直观显示两个基因敲除之后对脂肪细胞分化的影响,如下图所示:
InCellis智能显微成像系统拥有17寸智能触摸显示屏,超灵敏低光照CMOS彩色照相机可以给您带来出版级高质量荧光成像;此外结合内嵌细胞培养相关应用,如细胞计数、细胞转染率计算、细胞融合度评估、细胞测量等,可以快速准确助力您的细胞实验,让细胞实验*!